发布网友 发布时间:2024-09-26 15:00
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热心网友 时间:2024-09-27 20:56
在DNA提取过程中,加入巯基乙醇(Beta-Mercaptoethanol, BME)的主要目的是:
1. 蛋白质沉淀:巯基乙醇可以与蛋白质形成非可溶性沉淀物,有助于将蛋白质从DNA溶液中去除,因为巯基乙醇能够还原蛋白质中的二硫键,导致蛋白质沉淀。
2. DNA保护:巯基乙醇有助于保护DNA不被降解。在DNA提取过程中,核酸酶可能会降解DNA,而巯基乙醇的存在可以抑制这些酶的活性。
3. 去除RNA:巯基乙醇可以与RNA形成复合物,促使其沉淀,这在只需要纯化DNA而不需要RNA的实验中非常重要。
4. 提高DNA溶解度:巯基乙醇可以降低水的极性度,增加DNA在水相中的溶解度,有助于将DNA溶解在提取缓冲液中,并方便后续处理。
5. 抑制酚类氧化:巯基乙醇可以防止多酚类物质氧化,因为氧化后的核酸可能会变成灰黑色,影响DNA的质量。
6. 还原蛋白质二硫键:在RNA提取中,巯基乙醇用于破坏核糖核酸酶(RNase)蛋白质中的二硫键,有助于减少这些二硫键并变性蛋白质。
7. 保护蛋白质的巯基:在蛋白质提取中,巯基乙醇用于还原二硫键,使RNase失活,保护蛋白质的巯基。
巯基乙醇具有一定的挥发性和毒性,因此在实验操作时应采取适当的安全措施,避免吸入和接触皮肤。同时,巯基乙醇可能对某些实验有干扰作用,因此在特定的实验设计中,可能需要根据实验需要调整巯基乙醇的使用浓度和条件。
热心网友 时间:2024-09-27 20:55
DNA 提取时加入β-硫基乙醇(β-Mercaptoethanol,β-ME)的主要目的在于防止DNA的聚合和降解。β-ME是一种强的还原剂,可以与DNA中的SH基团(如 cysteine)结合,防止它们之间的作用从而导致DNA的聚合和降解。同时,β-ME也可以与DNA结合,保护DNA免受活性氧的损害,从而提高DNA提取的成功率和纯度。