siRNA转染肝癌HEPG2细胞,沉默miRNA是什么意思?是为了沉默miRNA的靶基因吗?需要构建质粒载体吗?

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热心网友

这个是生物题吧?
高中时都做过
因为mRNA是单链的,沉默的意思就是让他无法翻译,即合成一小段与他互补的mRNA链,二者通过碱基互补配对结合,组织原mRNA与核糖体结合从而阻止翻译过程,即为沉默,干扰mRNA就相当于对基因表达的干扰
(说实话我不愿意找我高中的卷子了,不然一定把图和详解给你发上来)
望满意

热心网友

这里面有很大的矛盾之处:
一、siRNA是干扰靶基因,原理是与目的基因转录的mRNA配对,以降解其表达;而miRNA是几个碱基与3端的几个碱基结合,以*基因表达水平;
二、siRNA是降解目的基因;而miRNA是*,所以存在正负*的情况,即可能使其目的基因表达降低,也可以使其目的基因表达升高,当然,现在发现的也只有一千来条,而且有如下情况,一个基因可能受多个miRNA是*,或是一个miRNA*多个基因,目前对这块的研究还正在深入中;
三、siRNA和miRNA虽然都只有二十来个BP,但他们是完全不同的二个东西,不能把他们混为一团。

热心网友

我觉得你是弄错东西了吧 siRNA和miRNA是类似的 都是用来沉默靶基因的表达 不同的是miRNA是一个*多个 而siRNA是一个只*一个 你可能遇到的实验是先验证miRNA通过*几个基因达到某种效果 然后单独转这几个基因的siRNA 看是否有这种效果 以确定该miRNA确实是通过这几个基因达到这种效果 可能说的比较绕了 不懂的再问我吧追问因为我做的实验是研究microRNA与一个基因表达关系的研究,组织部分都做完了 然后现在做体外实验 就是检测转染前后这个基因的蛋白、mRNA以及miRNA。因为标书是老板写的 我也没看明白,他说的就是siRNA转染,干扰miRNA的表达。我没搞明白siRNA转染了 沉默了靶基因 跟miRNA有什么关系?我们所研究的这个基因可能是我们研究的这几个miRNA的靶基因。这期间也查了一些资料 还是不太明白 请解答一下 谢谢!

追答加我说吧 号码资料里有。。。
可能是有什么已知的基因可以*该miRNA的表达 所以转那个基因的siRNA 影响miRNA表达后再看它的靶基因的变化

热心网友

Small interfering RNA (siRNA):siRNA是RNAi途径中的中间产物,siRNA降解与其序列互补配对的mRNA,通过互补配对而沉默相应靶位基因的表达

MicroRNAs(miRNAs)是在真核生物中发现的一类内源性的具有*功能的非编码RNA,通过碱基互补配对的方式识别靶mRNA,并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。与靶mRNA不完全互补的miRNA在蛋白质翻译水平上抑制其表达。

热心网友

siRNA是RNAi途径中的中间产物,siRNA降解与其序列互补配对的mRNA,通过互补配对而沉默相应靶位基因的表达,而且只*一个,转染siRNA到小鼠细胞可以使用转染试剂的,RFECT和LI[O系列的效果都是不错的选择。

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