IEC-18贴壁细胞传代密度及时间是多少?
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摘要大鼠回肠细胞 IEC-18细胞介绍该细胞来源于大鼠肠上皮细胞。细胞特性1)来源：大鼠肠上皮2)形态：上皮细胞样，贴壁生长3)含量：>lxl06 个/mL4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装大鼠回肠细胞 IEC-18细胞接受后的处理：1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。2.请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37°C培养约2-3h〇3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的完全培养基。4.如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。5.接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得。细胞用途：仅供科研使用。本公司的细胞培养操作规程，供参考1)培养基及培养冻存条件准备：1.准备DMEM培养基(DMEM，GIBCO，货号11995-065)，95%;优质胎牛血清，5%，添加0.1U/ml胰岛素。2. 培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养箱湿度为 70%-80%。3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。2)细胞处理：复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管迅速放入37°C水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。大鼠回肠细胞 IEC-18细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培养液后吹匀。移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14m咨询记录 · 回答于2021-04-27IEC-18贴壁细胞传代密度及时间是多少?细胞密度达80%-90%时间是4分钟大鼠回肠细胞 IEC-18细胞介绍该细胞来源于大鼠肠上皮细胞。细胞特性1)来源：大鼠肠上皮2)形态：上皮细胞样，贴壁生长3)含量：>lxl06 个/mL4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装大鼠回肠细胞 IEC-18细胞接受后的处理：1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。2.请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37°C培养约2-3h〇3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的完全培养基。4.如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。5.接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得。细胞用途：仅供科研使用。本公司的细胞培养操作规程，供参考1)培养基及培养冻存条件准备：1.准备DMEM培养基(DMEM，GIBCO，货号11995-065)，95%;优质胎牛血清，5%，添加0.1U/ml胰岛素。2. 培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养箱湿度为 70%-80%。3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。2)细胞处理：复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管迅速放入37°C水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。大鼠回肠细胞 IEC-18细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培养液后吹匀。移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14m接种密度是多少为宜，20万/毫升？30万/毫升？细胞长几天能传代培养？密度为80%-90%基本长2天就可以了在T75培养瓶培养吗？可是两天后计数细胞没有倍增，传代密度多少合适？是的密度都是80%-90%两天后细胞重悬计数活细胞浓度能达到多少万每毫升？大概在15000毫克
