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热心网友
首先说一下细胞在冻存过程中的主要威胁:
溶液效应:
原理和内容如图所示
胞外冰晶形成
冻存过程中细胞外形成胞外冰晶的形成会对细胞膜造成机械性损伤
脱水
胞内冰晶形成
原理和内容如图所示
因此在细胞冻存复苏过程中,要从以下几个方面防止上述损伤形成:
总的原则:慢冻快融,即冻存过程要逐步降温,能够使用程序降温仪当然最好了;复苏过程水温要控制适当,一般选择38℃,复苏过程要注意不断摇晃以缩短时间;
选择恰当的冻存保护剂,通常有DMSO,人血白蛋白,甘油,羟乙基淀粉,海藻糖,丙二醇等等,这个最好能自己通过多次摸索,找出一个适合自己所培养类型的细胞的稳定最优的配比组合;
冻存保护剂要提前预冷,滴加过程要缓慢等;
文库里有一篇文章,你可以学习一下:http://wenku.baidu.com/view/7aa84aeb5ef7ba0d4a733b3a.html