一氧化氮检测亚硝酸盐的方法
2024-09-29
来源：二三四教育网
2、制备样品：可能需要过滤含有高蛋白浓度的样品在分析前通过10kDaMW截止过滤器（BioVisionCat#1997-25）。添加0-75?l的向孔中取样，并使用分析缓冲液将体积调节至75?l。
3、向所有孔中添加5?l酶辅因子工作溶液。
4、向硝酸盐分析孔（未知和标准）中添加5?l硝酸还原酶，添加5测定时，用?l缓冲液代替硝酸还原酶（未知值和标准值）亚硝酸盐分开。
5、用盖子盖上平板，并在室温（RT）下培养1-4小时。1小时硝酸盐转化为亚硝酸盐的转化率约为90%，2小时转化率约为95%，4小时转化率约为99%转变
6、向每个孔中添加5?l增强剂。孵育30分钟以淬灭干扰化合物。
7、向每个孔中添加5?lDAN试剂。在室温下培养10分钟。向每个孔中添加5?lNaOH。在室温下培养10分钟。
8、在荧光计中使用Ex=360nm和Em=450nm读取板。
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