乌骨藤药材绿原酸测定中提取方法的研究

维普资讯 http://www.cqvip.com 中国中医药杂志２００７年４月　第５卷第４期　２．５方差分析　根据所得结果，计算出Ｆ值。通过对Ｆ值的比较，　得出Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四因素对结果的影响的显著性，从而　确定最佳提取条件。　表３　出膏率方差分析表　Ｂ　０．００６　Ｏ．Ｏ１１　Ｏ．４７１　０．００４　２　２　２　９　０．００３　７．０７６　Ｃ　Ｄ　０．００５　１２．０１６　０．２３５　５３６．５５３　０．０００４４　误差Ｓｓｅ　根据芍药苷方差分析表明，因素Ｄ对试验结果的　影响非常显著，因素Ａ和Ｃ也有显著影响。选取显著　因素的最好水平，得到最佳工艺条件为Ａ２ＢＪｃ２Ｄ２。　３结论与讨论　从方差分析可以看出，影响提取的主次因素为：　提取次数＞醇浓度＞提取时间＞溶媒用量。由于我们　选取芍药苷含量为主要指标，故芍药苷含量方差分析　结果为主要参考结果。提取次数为芍药苷含量及出膏　率的影响均非常大，２次提取芍药苷含量最高，３次提　取出膏率较大，说明第三次提取提出杂质部分较多，　根据出膏率方差分析表明，因素Ｄ对试验结果的　影响非常显著，因素Ｂ和Ｃ也有显著影响。选取显著　故选取２次提取：醇浓度对芍药苷的提取效果影响较　大，而对出膏率影响较小，故选取４０％乙醇提取：提　取时间对芍药苷含量及出膏率影响较显著，均以提取　１．５ｈ为佳；乙醇加入量对芍药苷含量几乎没有影响，　而仅影响出膏率，从节省资源上考虑，选取６倍量提　因素的最好水平，得到最佳工艺条件为＾。　ＣｚＤ。。　表４芍药苷含量方差分析表　方差来源离均差平方和自由度　Ａ　０．０３５　２　方差　Ｆ值显著性　取。最终的较优方案为Ａ。Ｂ　Ｃ。Ｄ。，即４０％乙醇，提取二　次，每次６倍量溶媒，提取１．５小时。　０．Ｏ１７　３９．３５４　・　乌骨藤药材绿原酸测定中提取方法的研究　王月敏于绍军夏素霞唐思　１１００３４）　（辽宁省中医药研究院中图分类号：Ｒ　９２７．２　文献标识码：Ｂ　文章编号：１７２８－－６０７７（２００７）Ｏ４—０ｏ３９—０３　乌骨藤具有抗肿瘤、平喘等作用，其含有的化学　成分主要为孕烷酯类还含有生物碱、皂苷、多糖及酚　１仪器、试剂与试药　１．１仪器ＬＣ－ＩＯＰ液相泵，ＬＣ－ＩＯＵＶ检测器；超声波　酸类成分…。以乌骨藤为原料的消癌平片已载入部颁　标准，消癌平片中绿原酸的含量测定研究已有报道　，　而目前尚无乌骨藤药材的质量标准。　清洗机。　ｉ．２试剂　甲醇为色谱纯，其它试剂为分析醇，水为　重蒸馏水。　我们在进行乌骨藤药材中绿原酸测定时发现，提　取条件对绿原酸的含量影响较大，特别是提取溶媒的　影响，故对提取方法、提取溶媒、提取时间进行了详　细的考察。　１．３药材购于辽宁省药材公司，经鉴定乌骨藤为萝　摩科植物乌骨藤Ｍａｒｓｄｅｎｉａ　ｔｅｎｏｃｉｓｓｉｍａ（Ｒｏｘｂ）　Ｗｉｇｈｔ　ｅｔ　Ａｒｎ的干燥藤茎。　绿原酸对照品来源于中国药品生物制品检定所　维普资讯 http://www.cqvip.com ・４０・　中国中医药杂志２００７年４月　第５卷第４期　（批号１１０７５３－－２００２１２），供含量测定用，经纯度检　查，含量为９９．６４％。　上述结果可见，超声提取２０分钟，绿原酸提取即　已完全，考虑到３０％甲醇提取液滤过困难，故超声提　取方法以５０％甲醇为提取溶媒，提取２０分钟为最佳提　２实验方法与结果　２．１绿原酸测定方法　２．１．１色谱条件与系统适应性Ｈｙｐｅｒｓｉ　ｌ　ＯＤＳ２（５　１１　取条件。　２．２．３药材取样量与溶媒比例的选择　药材取样量与溶媒按不同比例，超声提取２０分　钟，结果见表３。　表３药材取样量与溶媒比例考察结果　ｍ　４．６×２００ｍｍ），色谱柱：乙腈—０．４％磷酸（９：９１）　为流动相；检测波长３２７ｎｍ；理论塔板数按绿原酸峰　计算应不低于５０００。　２．１．２对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷　干燥至恒重的绿原酸对照品适量，加５０％甲醇制成每　ｉｍｌ含２５　Ｉｌ　ｇ的溶液，即得。　２．１．３供试品溶液的制备见２．２和２．３超声提取和　回流提取方法考察。　２．１．４测定方法分别精密吸取对照品溶液与供试　品溶液各１０　Ｉｌ　ｌ，注入液相色谱仪，测定其峰面积，　即得。　２．２超声提取方法考察　２．２．１提取溶媒选择取乌骨藤粉（４０目）５份，每　份各０．５ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加　入溶媒２５ｍｌ，密塞，称定重量，超声处理３０分钟，　放冷，称重，用相应溶媒补足减失的重量，摇匀，滤　过，取续滤液，即得，结果见表１。　表１　不同提取溶媒考察结果　提取溶媒　绿原酸的含量（％）　甲醇　０．１００　７０％甲醇　０．１８８　５０％甲醇　０．１９２　３０％甲醇　０．１９５　水　０．１６７　五种溶媒提取效果以甲醇、水为最差，７０％甲醇稍　次，３０％甲醇、５０％甲醇二者为高，且相近。　２．２．２提取时间选择采用３０％甲醇、５０％甲醇为提　取溶媒，提取时间对提取效果影响又进行了考察，结　果见表２。　表２　不同提取时间考察结果　药材：５０％甲醇（ｇ：ｍ１）　绿原酸含量（％）　０．５：２５　０．２０１　１＿０：２５　０．１９６　药材取样０．５ｇ与１ｇ，用２５ｍｌ溶媒提取，对绿原　酸的提取效果没有影响。　２．３回流提取方法考察　２．３．１提取溶媒选择取乌骨藤粉（４０目）３份，每　份０．５ｇ，精密称定，置圆底烧瓶中，分别精密加入３０％　甲醇、５０％甲醇、７０％甲醇２５ｍｌ，称定重量，回流提取　３０分钟，放冷，称重，用相应溶媒补足减失的重量，　摇匀，滤过，取续滤液，即得，结果见表４。　表４　回流提取溶媒考察结果　提取溶媒　绿原酸的含量（％）　７０％甲醇　０．１８５　５０％甲醇　Ｏ．１９Ｏ　３０％甲醇　０．１９０　回流提取方法中，亦以３０％甲醇与５０％甲醇提取效　果为高且相同，７０％甲醇稍次，考虑到３０％甲醇提取液　滤过困难，故选择以５０％甲醇为提取溶媒。　２．３．２提取时间选择采用５０％甲醇为提取溶媒，考　察提取时间对绿原酸提取率的影响，结果见表５。　表５　回流提取方法考察结果　提取时间（分）　绿原酸的含量（％）　３０　０．１９０　６０　０．１８９　从结果可知，回流提取３０分钟与６０分钟，绿原　酸提取效果相当，说明提取３０分钟即已完全。　３结论与讨论　３．１　比较超声与回流提取两种方法，绿原酸的提取效　果接近，超声方法较回流提取简便，易于操作。　维普资讯 http://www.cqvip.com 中国中医药杂志２００７年４月　第５卷　第４期　・４１・　３．２从试验结果可以看出，乌骨藤药材中绿原酸的高　效液相色谱测定的提取方法以采用５０％甲醇，超声提　取２０分钟为宜。　３．４有关乌骨藤药材绿原酸的高效液相色谱法研究　将另文发表。　【参考文献】　［１］　３．３本次测定的乌骨藤药材中绿原酸的含量与已报　道　，的结果相差较大，我们分析原因可能有－－．其一，　刘玉芬，孙风英，王玲，等．乌骨藤化学成分研究　［Ｊ］．中成药，１９９８，２０（９）：３５．　药材产地及采收季节不同所致含量差异较大：另一个　原因是提取方法不同所致，文献中提取溶媒采用的是　甲醇，而我们在提取条件考察中发现甲醇不能将绿原　酸提取完全，而致含量偏低。　［２］　谭朝阳，雷玉萍．ＨＰＬＣ法测定乌骨藤及其制剂消癌　平片中绿原酸的含量研究［Ｊ］．中医药学刊，２００４，　２２（７）：１３５４．　・针灸经络・　针刺配合埋针治疗中风后偏瘫肩痛的临床疗效观察　姚洁涤陈湘军姚洁辉谢辉　（湖南省郴州市第一人民医院４２３０００）　【摘要】目的：探讨针刺配合埋针治疗中风后偏瘫肩痛的临床疗效。方法：将中风后偏瘫肩痛患者７８例随机　分为治疗组３９例，对照组３９例。对照组常规治疗加针刺治疗，治疗组常规治疗加针刺配合埋针进行治疗。结果：　两组间总疗效、治疗前后肩痛程度积分改善、治疗后肩关节活动范围比较治疗组均优于对照组（Ｐ＜０．０５）。结论：针　刺配合埋针治疗中风后偏瘫肩痛具有良好疗效，比常规治疗加针刺效果更佳。　【关键词】中风后偏瘫肩痛针刺配合埋针　中图分类号：Ｒ　２５５．２　文献标识码：Ａ　文章编号：１７２８—６０７７（２００７）０４—＿ｏ０４１—０３　肩痛是偏瘫患者临床常见的并发症，肩痛不仅延　缓上肢功能的恢复而且直接影响患者的生存及康复质　侧偏瘫１９例，右侧偏瘫２０例。各组患者一般资料经统　计学分析具有可比性（Ｐ＞０．０５）。且两组患者肩关节前　量。本科自２００４年以来观察常规治疗加针刺、常规治　疗加针灸配合埋针治疗偏瘫肩痛７８例，现将资料报道　如下。　屈、后伸、内收、外展、旋前、旋后和环转的自主活　动范围比较经统计学分析无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。　１．２病例选择经ＣＴ或ＭＲＩ确诊，于２００４年起因脑血管　按照全国第４届脑血管病学术会议　１资料和方法　《各类脑血管疾病诊断要点》…诊断纳入排除标准：　１＿１一般资料①经ｃＴ或ＭＲＩ诊断为中风的偏瘫患者中有肩痛症状者，　既往无卒中死；②病程在１５天～４月者；③排除中风前　意外在我院接受康复治疗的意识恢复清楚、无感觉障　碍，并有偏瘫肩痛的患者７８例。按照随机数字表法按１　：１平均分为２组，常规治疗加针刺组３９例，男２２例，　有肩关节疼痛、活动障碍者；④排除各种血液病、类　淀粉样血管病、脑动脉炎、脑底异常血管网、癌脑转　移、丘脑病变等所致脑血管病者、上消化道出血者。　⑤排除糖尿病酮症酸中毒者、精神病患者及痴呆。　１．３治疗方法两组均按２００４年卫生部疾病控制司、　女１７例：年龄４１～７４岁，平均５５±１．５６岁：病程最短　１９天，最长１ｌ５天；脑出血１９例，脑梗死２０例；左侧偏　瘫１８例，右侧偏瘫２１例。针刺配合埋针组３９例，男１９　例，女２０例：年龄３８￣７６岁，平均５４±１．２５岁；病程　最短１４天，最长１ｌ１天；脑出血１８例，脑梗死３１例；左　中华医学会神经病学分会制定《中国脑血管防治指南》　常规处理：合理控制脑水肿、血压、并发症，维持水